BMS.MICROBIOLOGY

[﷽]
السلام عليكم👋

#MICROBIOLOGY:-
#GENERAL_BACTERIOLOGY:-
#بوست_رقم_[30]

Bacterial Genetic🧬
"""""""""""""""""""'""'""'"''''"""""
⏪اليوم ح نتحدث عن آخر جزئية في جابتر ال Genetic وهو____👇

🔴Genetic Recompination:-
""""""""""""""""""""""""""""""""""""""
۞ من التقنيات الحديثة ف عالم الاحياء الدقيقة ما يعرف بالهندسة الوراثية. ممكن نعرفها بانها:
is the biological technique involves modification & recombination of genetic material from different organisms to construct new gene combinations in vitro.

☜ وفيها بتم تعديل الجينات الوراثية للكائن الحي للحصول على صفات وراثية مرغوبة؛ وأيضا يتم تهجين جين من كائن مع جين آخر من كائن مختلف.

☜ بشرط انو التعديل دا يتم في المعمل:
#In_vitro.
☜ وليست داخل جسم الإنسان:
#Not_In_vivo.
__________
⏪ نبدأ بمثال تطبيقي:-

■ لو عايزين نعالج مرضى السكري من النوع اللي عندهم إنسولين منخفض أكيد ح نديهم إنسولين من مصدر خارجي صح؟.😉

■ فإذا جبنا انسولين من Foreign animal وحقناه ف جسم العيان اكيد ح ينتج عنها حدوث تفاعل مناعي:
#Immune_reaction .☹️

■ عشان كدة كان لابد من إنو نحضر ال Human insulin بالمعمل عن طريق الهندسة الوراثية:
#Genetic_recompination.
_______
۞ طيب ممكن تديني نظرة عامة عن الهندسة الراثية؟🔍

● بنجيب الكروموسوم اللي عليه الجين بتاع ال insulin و ناخد منو جين الانسولين نقوم ندخلو ف Host cells مثلا:
➢Bacteria
➢Fungi

● علشان يحصل انستنساخ لل DNA بتاع جين الإنسولين ويتحول الى mRNA وبعدو يتم ترجمته على هيئة بروتين الإنسولين.👌

۞ طيب لو جربنا الطريقة دي هل انت متأكد من إنك ح تنتج insulin؟🧐

● إحتمال إنك تفشل ف الإنتاج أو قد تنجح ف الإنتاج ولكن كميات ضئيلة جدا.

● وبالتالي عشان ننتج كميات كبيرة من ال Insulin لابد لنا من إنو نخلي الجين يتضاعف ف الأول.

● برضو الجين بالطريقة دي م ح يتضاعف لأنو:
#Non_replicon_fragment

● وعشان يتضاعف لابد من إننا نختو ف Replicon. ونحنا ف البوست الفات عرفنا انوع ال Replicon وهم:
◆Plasmid
◆Chromosome

۞ ولكن يفضل إننا م نخت الجين مباشرة Chromosome البكترياء ليه؟🧐

● لأنو الكروموسوم طويل؛ لذلك ح نختو في قطعة صغيرة عشان تقدر تدخل جوة الخلية. وبالتالي ح يعني ح نختو ف Plasmid.

● طيب نحنا عشان نقص الجين اكيد عايزين مقص والمقص هنا هو عبارة عن إنزيم ال:
#Endoneuclease_Enzyme

● بعدها بنجيب ال Vector واللي هو ال Plasmid ونقصه ايضا بنفس المقص. بحجم الجين المراد وضعه.

● ونجيب جين الإنسولين ونختو ف الحتة المقصوصة من ال Plasmid؛ ونقوم نلحم الأثنين بإنزيم:
#Ligase_Enzyme

● وبكدة بنكون حصلنا على:
#Recombinant_Molecule

● يلا ال Plasmid لما يتضاعف تبعا له ح يتضاعف الجين بتاع الإنسولين.

● ونحنا ذكرنا في البوست الفات إنو ح نستخدم ال Plasmid من النوع:
#Relaxid_Form

⏪طيب لييه؟😊
☜ عشان النوع دا من ال Plasmid ح يتضاعف ما بين 30-50 نسخة و تبعا له ح يتضاعف الجين بنفس المقدار.

● وآخيرا نقوم بإستخلاص الإنسولين الناتج:
#Purification
#صورة_رقم_1_55
══●══●══●══●══●══●══
✴وبالتالي ممكن نلخلص ال Requirment بتاعت ال Recombination ف الآتي:-

1⃣Target gene:-
☜ ودا الجين المراد مضاعفته والحصول على الصفات المرغوبة.

⇐ وطبعا في المثال المذكور هو جين الإنسولين:
#Insulin_gene

⇐ برضو بسموه 3 أسامي اخرى:

✦Passennger
⇐ لأنو ح يمش معانا في كل الخطوات وفكأنها رحلة وكأنه راكب.
✦Foreign:-
⇐ لأنو ح يدخل جوة خلية ح تعتبر بالنسبة ليه Foreign.
✦Insert:-
⇐ لأنو عامل insertion ف ال Cloning vector.
____
2⃣Restriction Endonuclease:-
☜ الإنزيم دا محتاجين ليهو عشان نفتح بيها جزء من ال Vector ونخت فيها الجين المطلوب.
_______
3⃣Cloning vector:-
☜ وطبعا دا ال carrier molecule اللي بنضع عليه الجين المراد. عشان نضاعف من الجين وبالتالي نحصل على قدر اكبر من الصفات المرغوبة.

☜ وفي المثال إستخدمنا ال Plasmid.
____
4⃣DNA Ligase Enzyme:-
☜ الإنزيم دا بساعد ع إلتحام الجزء من ال Plasmid بالجين.

☜ الخليط الناتج ح نسميهو شنو؟
#Recombinant_molecule
______________
5⃣Biological Host:-
☜ بنقوم ندخل ال Recombinant molecule داخل عائل مناسب مثلا:
▧ Virus.
▧ Bacteria.
▧ Eukaryotic celle.
══●══●══●══●══●══●══
⏪طيب فيما يلي نمسك واحدة واحدة:
①Target Gene:-
"""""""""""""""""""""""""
❍ قلنا إنه دا الجين المطلوب مضاعفته.

❍ ح نجيبو من المصدر بتاعه واللي هو الكروموسوم بتاعه؛ وبنقطعه الى أجزاء:
#Cleavage

[وطبعا التقطيع دا بتم بواسطة إنزيم مذكور آنفا: Restriction endoneuclease enzyme]

❍ إذا كان موقع الجين ف الكروموسوم مجهول ويصعب تحديده؛ في الحالة دي بنقوم بأخذ mRNA بتاع المنتج ونعمل له:
#Reverse_transcription

#تابع⬇

www.tgoop.com/bmsmicrobiology/275

5.7K viewsبدرالدين محمد Bedro, edited  Sep 13, 2020 at 21:19

[﷽]
السلام عليكم👋

#MICROBIOLOGY:-
#GENERAL_BACTERIOLOGY:-
#بوست_رقم_[30]

Bacterial Genetic🧬
"""""""""""""""""""'""'""'"''''"""""
⏪اليوم ح نتحدث عن آخر جزئية في جابتر ال Genetic وهو____👇

🔴Genetic Recompination:-
""""""""""""""""""""""""""""""""""""""
۞ من التقنيات الحديثة ف عالم الاحياء الدقيقة ما يعرف بالهندسة الوراثية. ممكن نعرفها بانها:
is the biological technique involves modification & recombination of genetic material from different organisms to construct new gene combinations in vitro.

☜ وفيها بتم تعديل الجينات الوراثية للكائن الحي للحصول على صفات وراثية مرغوبة؛ وأيضا يتم تهجين جين من كائن مع جين آخر من كائن مختلف.

☜ بشرط انو التعديل دا يتم في المعمل:
#In_vitro.
☜ وليست داخل جسم الإنسان:
#Not_In_vivo.
__________
⏪ نبدأ بمثال تطبيقي:-

■ لو عايزين نعالج مرضى السكري من النوع اللي عندهم إنسولين منخفض أكيد ح نديهم إنسولين من مصدر خارجي صح؟.😉

■ فإذا جبنا انسولين من Foreign animal وحقناه ف جسم العيان اكيد ح ينتج عنها حدوث تفاعل مناعي:
#Immune_reaction .☹️

■ عشان كدة كان لابد من إنو نحضر ال Human insulin بالمعمل عن طريق الهندسة الوراثية:
#Genetic_recompination.
_______
۞ طيب ممكن تديني نظرة عامة عن الهندسة الراثية؟🔍

● بنجيب الكروموسوم اللي عليه الجين بتاع ال insulin و ناخد منو جين الانسولين نقوم ندخلو ف Host cells مثلا:
➢Bacteria
➢Fungi

● علشان يحصل انستنساخ لل DNA بتاع جين الإنسولين ويتحول الى mRNA وبعدو يتم ترجمته على هيئة بروتين الإنسولين.👌

۞ طيب لو جربنا الطريقة دي هل انت متأكد من إنك ح تنتج insulin؟🧐

● إحتمال إنك تفشل ف الإنتاج أو قد تنجح ف الإنتاج ولكن كميات ضئيلة جدا.

● وبالتالي عشان ننتج كميات كبيرة من ال Insulin لابد لنا من إنو نخلي الجين يتضاعف ف الأول.

● برضو الجين بالطريقة دي م ح يتضاعف لأنو:
#Non_replicon_fragment

● وعشان يتضاعف لابد من إننا نختو ف Replicon. ونحنا ف البوست الفات عرفنا انوع ال Replicon وهم:
◆Plasmid
◆Chromosome

۞ ولكن يفضل إننا م نخت الجين مباشرة Chromosome البكترياء ليه؟🧐

● لأنو الكروموسوم طويل؛ لذلك ح نختو في قطعة صغيرة عشان تقدر تدخل جوة الخلية. وبالتالي ح يعني ح نختو ف Plasmid.

● طيب نحنا عشان نقص الجين اكيد عايزين مقص والمقص هنا هو عبارة عن إنزيم ال:
#Endoneuclease_Enzyme

● بعدها بنجيب ال Vector واللي هو ال Plasmid ونقصه ايضا بنفس المقص. بحجم الجين المراد وضعه.

● ونجيب جين الإنسولين ونختو ف الحتة المقصوصة من ال Plasmid؛ ونقوم نلحم الأثنين بإنزيم:
#Ligase_Enzyme

● وبكدة بنكون حصلنا على:
#Recombinant_Molecule

● يلا ال Plasmid لما يتضاعف تبعا له ح يتضاعف الجين بتاع الإنسولين.

● ونحنا ذكرنا في البوست الفات إنو ح نستخدم ال Plasmid من النوع:
#Relaxid_Form

⏪طيب لييه؟😊
☜ عشان النوع دا من ال Plasmid ح يتضاعف ما بين 30-50 نسخة و تبعا له ح يتضاعف الجين بنفس المقدار.

● وآخيرا نقوم بإستخلاص الإنسولين الناتج:
#Purification
#صورة_رقم_1_55
══●══●══●══●══●══●══
✴وبالتالي ممكن نلخلص ال Requirment بتاعت ال Recombination ف الآتي:-

1⃣Target gene:-
☜ ودا الجين المراد مضاعفته والحصول على الصفات المرغوبة.

⇐ وطبعا في المثال المذكور هو جين الإنسولين:
#Insulin_gene

⇐ برضو بسموه 3 أسامي اخرى:

✦Passennger
⇐ لأنو ح يمش معانا في كل الخطوات وفكأنها رحلة وكأنه راكب.
✦Foreign:-
⇐ لأنو ح يدخل جوة خلية ح تعتبر بالنسبة ليه Foreign.
✦Insert:-
⇐ لأنو عامل insertion ف ال Cloning vector.
____
2⃣Restriction Endonuclease:-
☜ الإنزيم دا محتاجين ليهو عشان نفتح بيها جزء من ال Vector ونخت فيها الجين المطلوب.
_______
3⃣Cloning vector:-
☜ وطبعا دا ال carrier molecule اللي بنضع عليه الجين المراد. عشان نضاعف من الجين وبالتالي نحصل على قدر اكبر من الصفات المرغوبة.

☜ وفي المثال إستخدمنا ال Plasmid.
____
4⃣DNA Ligase Enzyme:-
☜ الإنزيم دا بساعد ع إلتحام الجزء من ال Plasmid بالجين.

☜ الخليط الناتج ح نسميهو شنو؟
#Recombinant_molecule
______________
5⃣Biological Host:-
☜ بنقوم ندخل ال Recombinant molecule داخل عائل مناسب مثلا:
▧ Virus.
▧ Bacteria.
▧ Eukaryotic celle.
══●══●══●══●══●══●══
⏪طيب فيما يلي نمسك واحدة واحدة:
①Target Gene:-
"""""""""""""""""""""""""
❍ قلنا إنه دا الجين المطلوب مضاعفته.

❍ ح نجيبو من المصدر بتاعه واللي هو الكروموسوم بتاعه؛ وبنقطعه الى أجزاء:
#Cleavage

[وطبعا التقطيع دا بتم بواسطة إنزيم مذكور آنفا: Restriction endoneuclease enzyme]

❍ إذا كان موقع الجين ف الكروموسوم مجهول ويصعب تحديده؛ في الحالة دي بنقوم بأخذ mRNA بتاع المنتج ونعمل له:
#Reverse_transcription

#تابع⬇

BY BMS.MICROBIOLOGY